Microscopie 2010

par **firebirdv** le Mer 6 Jan 2010 - 21:43

ça y est 2009 est fini et déjà le doute nous guette. Manque d'inspiration, de motivation ? Que faire? Revendre le matériel et passer à autre chose? Et puis quoi encore, C'est la nouvelle année, l'heure des bonnes résolutions. Alors c'est parti !
Que faire ? extraire l' ADN d'une banane et l'observer au microscope ? Organiser une course en ligne de protozoaires? Colorer en bleu blanc rouge de l'amidon de patate ?
Mieux que ça, j'ai rencontré le "Magicien", celui de la carte de voeux. Il m'a dit " tu as des difficultés avec la profondeur de champs? et tu es très déçu? Et même avec tous tes diaphragmes, tu n'arrives à rien ? Voici peut être la solution: Comment vaincre la PROFONDEUR DE CHAMPS ?
Voici un exemple difficile pour moi. Qu'en pensez vous pour une première approche? PERYFRAN, tu peux te lacher! J'ai besoin de ton avis.

image originale d'une diatomée:

son image composite:

par **mike88** le Mer 6 Jan 2010 - 22:06

La deuxième est très bien beaucoup plus sympas et pas floue, pour la profondeur de champs ben la je ne sais que dire

par **diaph16** le Mer 13 Jan 2010 - 16:25

J'ai déplacé le fil dans le bon forum.

par **firebirdv** le Ven 15 Jan 2010 - 18:00

à la fin de l'année dernière, j'ai eu la chance de trouver un condenseur de HEINE avec ses objectifs dédiés (10-25-40-90). Sans entrer dans le détail, ce condenseur est capable de passer en continu, du fond clair, au fond noir et au contraste de phase. Quelle est l'intérêt me direz vous? Tout simplement pour arriver à voir des objets dans un milieu ayant un indice de réfraction proche. Exemple: réussir à voir une lame de verre au fond d'un aquarium rempli d'eau.
J'ai le même problème pour voir une diatomée en silice dans son milieu d'inclusion, ici, la gélatine glycérinée. J'utilise la gélatine glycérinée car elle est simple à utiliser et surtout non toxique par rapport à d'autres milieux d'inclusion (beaume du canada/xylol).
Voici un exemple de diatomée centrique (podosira stelligera) sur fond noir, objectif PV 25, grossissement 500 fois environ.

Le condenseur de HEINE est difficile à mettre en oeuvre, notamment au niveau du centrage par rapport à l'objectif. Je commence seulement à comprendre comment il fonctionne.

par **diaph16** le Sam 16 Jan 2010 - 9:04

C'est réellement de toute beauté.

On dirait de la photo astronomique.

par **diaph16** le Sam 16 Jan 2010 - 15:48

Pour la compilation de photos prises à différentes profondeurs, j'ai trouvé le logiciel gratuit qui permet de faire ce genre de choses (grâce aux indications de firebirdV):

CombineZP

par **firebirdv** le Sam 16 Jan 2010 - 16:08

voici une image de la même diatomée, faite avec deux images compilées. Le résultat est moins spectaculaire mais avec plus d'information au niveau du détail. Deux images compilées grâce à COMBINEZP, faites avec un objectif PV Apo de 40, pour un grossissement d'environ 800 fois.

NB: il y a moins de cochonneries sur le capteur par rapport aux premières images 2010 car j'ai nettoyé le capteur à l'aspirateur.

par **Titou** le Dim 17 Jan 2010 - 12:52

C'est magnifique.

Quelle est la différence entre la première et la deuxième ? Pourquoi la première est floue ?

La troisième est vraiment extraordinaire, les aberration chromatiques donnent une ambiance irréelle, presque magique, et c'est très lumineux.

Tu le place où ton condenseur ? Cà ressemble à quoi ?

par **razorconcept** le Dim 17 Jan 2010 - 13:47

ça je sais pas faire ( je passe à peine le rapport 1:1 avec un 60macro + bague allonge).
mais j'ai vu à l'oeuvre un gars spécialiste de la photo de moisissures qi avait un montage sympa:
un 24mm inversé fixé sur une colonne d'agrandisseur avec un réglage micrométrique.
2 spots "lumière froide" par fibre optique.
Il faisait une série de 10 à 15 photos à f8 (là où l'objo donne le meilleur piqué).
cette série d'image était ensuite assemblée via CombineZ pour donner une seule photo à grande pdf.
Le matériel mis en oeuvre était déjà impressionnant.

par **firebirdv** le Dim 17 Jan 2010 - 16:54

pour te répondre Titou,
La première image est une diatomée avec encore l'algue à l'intérieur et avec ce grossissement j'ai une faible profondeur de champs.
J'ai choisi une image unique, parmi une série avec des mises au point différentes, comme référence. Puis j'ai "combiné" 3 images avec différentes mises au point. J'ai essayé avec 5 images mais le résultat est moins bon. La deuxième est donc une image composite de 3 images aditionnées créant un profondeur de champs artificiellement plus importante résultant des mises au point successives. Ces photos sont dites en fond clair comme en macro.
Pour la troisième photo, nous sommes en fond noir. Cette fois ci nous utilisons une propriété particulière de la lumière. Je rappelle que la lumière, dans l'état actuel des sciences, a un aspect corpusculaire(le photon) et un aspect ondulatoire(une oscillation). Le premier aspect me donne une intensité de lumière, le deuxième une couleur.
L'aspect ondulatoire permet à la lumière de contourner les objets. C'est ce phénomène qu'utilise le condenseur en fond noir pour illuminer l'objet en lumière oblique et qui crée cet éclairage particulier.
Voici un microscope ortholux avec un condenseur de Heine visible sous la platine. C'est la partie cylindrique. Il n'a pas de diaphragme.

Pour plus d'informations sur ce condenseur voir Condenseur de HEINE dans Google

Enfin pour la dernière image, nous sommes en pseudo contraste de phase.

par **Titou** le Dim 17 Jan 2010 - 17:47

Merci pour l'explication :D .

Je comprends le système d'assemblage, c'est le même que celui décrit par Razor.

par **firebirdv** le Lun 18 Jan 2010 - 9:16

Le week end a été riche en observations. Voici une nouvelle diatomée petroneis monilifera d'eau de mer. Image faite en contraste de phase avec un objectif PV 25 grossissement 500 fois environ.

par **Titou** le Lun 18 Jan 2010 - 20:40

C'est de bien meilleure qualité que tes premières photos !

De plus en plus net, des détails, ton nouveau montage est un gros progrès

.

par **firebirdv** le Jeu 21 Jan 2010 - 22:11

une nouvelle diatomée piégée dans du baume du canada, elle ressemble à une Petroneis monilifera mais avec un mouvement supplémentaire dans le frustule, sur les côtés. Encore avec l'objectif de PV 25 et un grossissement d'environ 500 fois en contraste de phase (d'où cet effet, on a marché sur la lune)
image composite (4 images compilées avec combine ZP)

par **diaph16** le Ven 22 Jan 2010 - 9:44

On se rapproche de la 3D.

par **firebirdv** le Lun 25 Jan 2010 - 21:30

les diatomées sont un peu tristes, souvent en noir et blanc. Aussi je vous propose de les éclairer différemment pour les embellir. Elles le méritent bien, toutes cisellées vêtues dans leur robe de cristal.

par **f.ghis** le Lun 25 Jan 2010 - 21:37

c magique

par **mike88** le Lun 25 Jan 2010 - 22:19

Je ne comprends rien de tout ce qu’il raconte, mais j’aime bien tes photos de ce monde invisible a l’œil. Tu as déjà tenté les acariens (je ne sais pas si c’’est un domaine qui te plait)

par **firebirdv** le Mar 26 Jan 2010 - 19:33

Je n'ai rien contre les accariens mais pour l'instant, je n'ai pas réussi à en trouver chez moi. Et puis, il faut bien l'avouer, mes préoccupations du moment sont de mieux maitriser le condenseur de Heine, les préparations microscopiques sur lames et enfin de mieux caler l'éclairage et la webcam. Par exemple, j'ai commencé à faire des lames mais en mettant la préparations sur la lame et non la lamelle. Je me retrouve avec des aberrations car les objectifs sont calculés pour une épaisseur de lamelle de 0,17 mm et non 0,17 + l'épaisseur du baume du canada.
Enfin, les diatomées, grâce à la finesse incroyable des frustules, sont un bon moyen de voir si l'on progresse ou non.
Voici d'autres images qui, même si elles ne sont pas d'une trés grande qualité intrinsèque, restent malgré tout assez curieuses.

par **mike88** le Mar 26 Jan 2010 - 19:50

ne fais plus le ménage pendant qq jour fire tu en auras après :D

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